Руководство по применению ПЦР.
ПЦР включает несколько стадий: 1) денатурация ДНК, 2) отжиг праймеров и 3) синтез ДНК и осуществляется в термоциклерах (амплификаторах). ПЦР является чрезвычайно эффективным методом, обладающим высокой специфичностью и позволяющим получать свыше 10 млн копий целевой ДНК из нескольких молекул. Поскольку ПЦР в то же время является сложным методом, очень важно выбрать высококачественные реактивы, расходные материалы и приборы для получения оптимальных результатов.
С момента появления первых термоциклеров в 1987 году Applied Biosystems продолжает разрабатывать новые ПЦР реагенты и инструменты для различных исследований в области молекулярной биологии.
| Применение |
Возможности |
Рекомендуемые реагенты |
| Клонирование |
- Конструирование кДНК-библиотек
- Описание генных семейств
- Широкомасштабное картирование генома с использованием BACs/YACs |
- AmpliTaq® 360 DNA Polymerase
- AmpliTaq Gold® 360 DNA Polymerase
- GeneAmp® High Fidelity PCR System |
| Анализ экспрессии |
- RACE-анализ для амплификации неизвестной кДНК
- Дифференциальное обнаружение
- Детекция редких транскриптов
- Количественная экспрессия генов |
- GeneAmp® Gold RNA PCR Kit
- High Capacity RNA-to-cDNA Master Mix
- High Capacity RNA-to-CDNA Kit |
| Генотипирование |
- Аллель-специфическая ПЦР
- Полиморфизм длины амплифицированных фрагментов
- Гаплотипирование
- ПЦР с эмульсионной связью
- Анализ SNPs
- Исследование микросателлитов |
- AmpliTaq® 360 DNA Polymerase
- AmpliTaq Gold® 360 DNA Polymerase |
| Случайный и направленный мутагенез |
- Структурно-функциональные связи белков, РНК и ДНК
- Белковая инженерия
- Добавление уникальных сайтов рестрикции
- Конструирование ДНК-библиотек |
- GeneAmp® High Fidelity PCR System |
| Секвенирование |
- Детекция мутаций
- Анализ генов-кандидатов
- Исследование генетических связей
- Эволюционные исследования
- Геномное секвенирование
- Прогулка по хромосоме |
- AmpliTaq® 360 DNA Polymerase
- AmpliTaq Gold® 360 DNA Polymerase
- AmpliTaq Gold® Fast PCR Master Mix, UP
- GeneAmp® High Fidelity PCR System |
| Амплификация бактериальных генов |
- Детекция патогенов
- AFLP-анализ для сравнительной бактериальной геномики |
- AmpliTaq Gold® Fast PCR Master Mix, UP |
| Амплификация вирусных генов |
- NASBA
- Детекция патогенов |
- AmpliTaq® 360 DNA Polymerase
- AmpliTaq Gold® 360 DNA Polymerase |
| Амплификация длинных фрагментов (5000 – 20000 пар оснований) |
- Картирование генов
- Амплификация генома митохондрий
- Изучение кластеров генов
- Клонирование длинных транскриптов кДНК |
- GeneAmp® High Fidelity PCR System |
| Мультиплексная ПЦР |
- Идентификация личности
- Исследование VNTRs |
- AmpliTaq Gold® 360 DNA Polymerase |
| ПЦР в быстром режиме |
- Высокопроизводительный скрининг
- Скрининг ПЦР-библиотек
- Быстрое генотипирование трансгенных животных |
- GeneAmp® Fast PCR Master Mix
- AmpliTaq® Gold Fast PCR Master Mix, UP |
Для всех применений кроме ПЦР в быстром режиме совместимыми термоциклерами (амплификаторами) являются модели Veriti, 9700 и 2720.
Для ПЦР в быстром режиме совместимыми термоциклерами (амплификаторами) являются модели 96-ти луночный Veriti Fast и 96-ти луночный Vetiti (0.2 мл).
